La Unidad de Citometría de Flujo y Separación Celular del ISPA ofrece apoyo técnico y asesoramiento a los grupos de investigación del instituto o a investigadores visitantes interesados en la citometría de flujo, para el diseño de experimentos, selección de marcadores, adquisición y análisis de muestras así como la discusión de los resultados obtenidos.

Los principales servicios ofrecidos son:

• Estudios fenotípicos mediante el marcaje de antígenos en superficie e intracitoplásmicos.
• Medida de la viabilidad celular a través del uso de marcadores vitales (Hoechst, DAPI IP, 7AAD, fixable viability dyes, etc).
• Determinación de apoptosis celular (Anexina V, Caspasa3).
• Determinación de poblaciones genéticamente modificadas a través de genes reporteros (BFP,GFP,YFP,RFP, entre otros).
• Determinación de las distintas fases del ciclo celular.
• Cuantificación de la proliferación celular (Brdu, ki67, etc).
• Medida de autofagia en líneas celulares (Medida de la proteína LC3, CytoID©, etc.).
• Estudio de moléculas solubles con el uso de microesferas (cytometric bead array “CBA”).
• Determinación de microvesículas.
• Aislamiento de poblaciones celulares (en tubo/en placa/ célula única) mediante tecnología FACS (“Fluorescence Activated Cell Sorting”).

Además, la Unidad trabaja en el desarrollo de nuevas tecnologías y evaluación de nuevos equipos, organizando actividades de formación y divulgación sobre citometría de flujo anualmente.

La unidad de citometría de flujo del ISPA, está compuesta por:

• Citómetro de flujo FACS Aria IIu (BD biosciences)
  Láser  488nm (con detectores para FITC,  Pe,  PerCP/Pe-Cy5/PercP-Cy5.5, Pe-Cy7 y demás compatibles más dispersión frontal, FSC y lateral, SSC)
  Láser  633nm (con detectores APC, APC-H7/APC-Cy7 y compatibles)
  Bloque de “sorting” con capacidad hasta 4 tubos de colección simultánea y aislamiento en placa (posibilidad de separación single cell).
  Software de análisis Facs Diva V8.02
• Citómetro espectral Northern Lights (Cytek)
  Configuración 3L 16V14B8R, con capacidad de medición hasta 24-28parámetros
  Software de análisis SpectroFlo v3.0, con capacidad de extracción de autofluorescencia
  Recogida de raw / unmixed data.
• Softwares offline
  FlowJo v10.7 (en formato dongle)
  FCS Express 7 (licencia anual)
  Con capacidad de análisis automático de archivos .fcs, incluyendo modelos matemáticos para ciclo celular y proliferación, algoritmos de reducción de dimensionalidad y concatenación de archivos.

• Los usuarios podrán solicitar el uso del citómetro para adquisición o separación celular, o bien sólo de la plataforma de análisis, al personal de la unidad de Lunes a Viernes en horario de 9 a 16h.
• El uso y manejo del equipo FACS Aria IIu será llevado a cabo por el personal técnico del servicio. El equipo NL Cytek podrá utilizarse en autoservicio previa formación del usuario desde la plataforma de citometría y tras los ajustes oportunos establecidos.
• En caso de necesitar su uso fuera del horario marcado, se podrá acordar un horario prefijado para tal fin.
• El día y hora adjudicados irán en función de la disponibilidad y compatibilidad con otras reservas, que marcará el personal de la unidad y se regirá exclusivamente por orden de solicitud.
• Sólo se admitirán reservas que se realicen con una antelación mínima de 3 días laborables.
• Dado que todo tipo de reserva, conlleva el encendido del equipo y calibración, las cancelaciones también deberán realizarse con un día de antelación. De no ser así, se efectuarán cargos acordes a las tarifas establecidas.

(Los precios no incluyen IVA)